芽孢菌的分離培養(yǎng)

芽孢菌參與許多有機(jī)物的轉(zhuǎn)化及生物降解，多數(shù)為好氧或兼性厭氧微生物，菌體桿狀或球狀。芽孢是在菌體內(nèi)形成的圓形或橢圓形的內(nèi)生孢子。芽孢的代謝活力弱，對不良環(huán)境如高溫、干燥、化學(xué)藥品等的抵抗力強(qiáng)。
分離步驟如下：
（1）將水樣接種于刺激芽孢生長的培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)18～24小時。將培養(yǎng)好的菌懸液置于80℃水浴中加熱10～20分鐘以殺死不能形成芽孢的菌體。
刺激芽孢生長的培養(yǎng)基如下：
蛋白胨 10g KH2PO4 1.5g
酵母膏 3g Na2HPO4 2 g
淀粉 3g H2O 1000 ml
MgSO4·7H2O 0.1g pH7.8
121℃， 15分鐘
（2）將加熱處理過的菌懸液稀釋為10-3、10-4、10-5，分別取0.5mL接入無菌平板，倒入芽孢菌分離培養(yǎng)基，混勻，置于35℃，培養(yǎng)18～24小時。
芽孢菌分離培養(yǎng)基如下：
用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與70Bx麥芽汁培養(yǎng)基，溶化后以1:1的量混勻即成.
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方為：
肉膏 3～5g NaCl 5 g
蛋白胨 10 g 瓊脂 15～20g
H2O 1000ml pH 7.0～7.2
121℃，20分鐘
（3）挑取單菌落作分離純化培養(yǎng)：
單菌落→液體培養(yǎng)基→菌懸液→劃線分離，經(jīng)數(shù)次重復(fù)，直至由單個細(xì)胞形成單獨(dú)的菌落。